初次接触EMSA的人面对市场上各种EMSA试剂可能出现选择困难。网上也常看到有”如何选择EMSA试剂盒“的求助。微奥基因从事EMSA产品开发与服务多年,对产品与市场情况非常了解,下面的意见供参考。考。
【A】选用荧光EMSA试剂盒的一般原则。
1. 产品的成熟程度:产品在市场上有多少时间,有多少人用过。
2. 是否有完整EMSA产品链:做EMSA需要各种相关试剂。如果服务商本身都没有条件做EMSA,可以认定所出售的
EMSA试剂盒根本没经过检验。
3. 了解公司的技术力量:购货前可向商家问一些EMSA技术问题。如果商家的知识还没有客户懂得多,Forget
it !!!
4. 了解用户满意度:有多少人用过,满意度怎么样。
5.
是否有与产品相关的文章发表:尽管没有文章并不能证明产品好坏,但有相关文章发表肯定对试剂选择有利。
6. 不要混用几家公司产品:因为 1)不同厂家所用的产品成分各有不同,混合使用很可能不工作。2)会导致难于找出
EMSA遇到的问题。3)如果结果不理想,都不知道向那家公司求助。
【B】荧光法EMSA试剂盒产品比较。不同EMSA测定技术比较见另页。化学发光法EMSA详见有关介绍。
EMSA-SYBR
IRDye EMSA
CoolShift-ird
完全荧光EMSA
完全荧光EMSA+
生产厂商
Thermo1
Li Cor2
微奥基因
标记物
-
IRDye700
-
TYE705
TYE705
结合反应液
+
+
+
+
+
Poly[dI: dC]
+
+
+
+
+
鱼精蛋白
-
+
-
-
-
DTT
-
+
-
-
-
Tween20
-
+
-
-
-
Enhancer
-
-
+
+
+
上样液
+
+
+
+
+
荧光标记探针
-
-
-
+
+
SYBR染液
+
-
-
-
-
胶固定液
+
-
-
-
-
蛋白染液
+4
-
-
-
-
MgCL2
-
+
+
-5
-5
KCL
-
+
+
-5
-5
NP40
-
+
+
-5
-5
Glycero
-
+
+
-5
-5
EDTA
-
+
+
-5
-5
BSA
-
-
+
-5
-5
可选荧光探针
-
7种
上百种
上百种
上百种
质控标记探针
-
-
+3
-
+3
竞争探针
-
-
option
option
+
突变探针
-
-
option
option
+
质控蛋白
-
-
option
option
option
阴性对照4
-
-
option
option
option
阳性对照4
-
-
option
option
option
EMSA预制胶
-
-
option
option
option
EMSA电泳液
-
-
option
option
option
测定样品数
10片胶
100
100
30/50
30/50
价格
~1500
~2500
1450
1995/2895
2442/3395
注1.
EMSA-SYBR试剂盒是通过染非标记DNA探针显示结果,价格便宜。但不适合大多数客户,
因为
;1)灵敏度低,需要使用比标记探针多10-20倍的探针与样品。2)由于测定中不能使用Poly[dI:dC],用于样品测试会出现高背景。3)比较适合于纯化蛋白样品的EMSA测定。3)所配的蛋白染色荧光试剂意义不大:EMSA胶中有蛋白染色带无法推断转录因子是否激活,不做蛋白染色对文章发表没有影响。实际上,EMSA测定基本都不做蛋白染色。
注2.
Li Cor 的近红外荧光EMSA 具有灵敏度高,快速出结果的优点。但 1)价格比较贵
- 标记探针 700元/25次
。2)只有7种配套近红外荧光探针,探针选择有限。3)国内基本不能获得有效技术支持。
注3. 微奥基因的质控探针带多个看家基因启动子结合位点,能够与客户的核提取产生结合带,除了用作试剂质控,还能直接确定客户样品质量。客户也可以向我们购买质控蛋白。
注4.
微奥基因供应数十种与客户待测转录因子相同的阳性/阴性对照。
注5.
有关成分已经整合到特定转录因子的反应液中。测定条件已经确定,不需要客户再做优化。
【C】微奥基因 荧光EMSA产品与服务
微奥基因 提供品类最多的近红外荧光EMSA产品(产品列表)与各种转录因子活性检测的技术服务(服务列表),使用我们产品和服务的客户已发表上千篇文章。我们的技术支持一流,QQ:2941312161与微信:微奥基因 24小时开放。记忆中,我们还没有遇到解决不了的EMSA问题。
【D】EMSA相关产品的选购(详情)