技术服务: CHiP

  

Chromatin Immunoprecipitation(ChIP)

服务项目介绍

染色质免疫沉淀技术(ChIP)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性,可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。特别是由于该技术不断的发展和完善,其应用范围已经从研究目的蛋白与已知靶序列间的相互作用,发展到研究目的蛋白与整个基因组的未知序列的相互作用;从研究一个目的蛋白与DNA的相互作用,发展到研究两个蛋白与DNA共同结合的相互作用;从研究启动子区域的组蛋白的修饰,发展到研究结合在DNA序列上的蛋白复合物。随着对基因功能研究的不断深入,这项技术正越来越多的被应用于科研的各个领域。Viagene提供各种转录因子测定与鉴定的相关服务。

工作原理

染色质免疫沉淀技术的原理是:在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,利用抗原抗体的特异性识别反应,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定,染色质断裂,染色质免疫沉淀,交联反应的逆转,DNA的纯化,以及DNA的鉴定。因为ChIP实验涉及的步骤多,结果的重复性较低,所以对ChIP实验过程的每一步都应设计相应的对照,而且对结果的分析也需要有一定的经验。对于刚刚开始使用ChIP技术的研究人员来说,使用Viagene的技术服务会达到事半功倍的效果。

ChiP与EMSA的关系

ChiP阳性结果反映的是体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。EMSA是对DNA结合蛋白与DNA结合进行准确分析鉴定的技术,反映的是体外蛋白因子与基因组DNA结合的状况。ChiP实验比较复杂,影响因素多,容易出现假阳性与假阴性。一般还需要用EMSA结合竞争实验与Super Shift进行精确鉴定。对某种转录因子对基因调控机理的研究,同时有ChiP与EMSA的资料更有说服力。但许多实验课题如鉴定SNP对蛋白因子的结合,鉴定DNA结合因子的亚单位等,仅仅用EMSA就能够说明问题。

Viagene提供CHiP技术服务。在一个单位同时做EMSA与技术服务,结果更可靠。有需要请联系我们。

  

    

 

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