EMSA方法比较

  

Viagene的基于化学发光的非放射性EMSA试剂与技术服务,已得到越来越多用户的认可。Viagene公司的科学家并持续对产品进行改进以期提供更多高效、快速、价低的实验试剂。 在对比各种EMSA测定方法中,我们发现基于地高辛标记法的EMSA测定灵敏度低,操作繁琐,耗时,我们决定不做与地高辛标记有关的任何产品开发。另一方面,我们发现用近红外荧光分子标记的探针做EMSA测定,效果不错,但存在探针在国内不易获得,探针容易产生聚集等问题。为此,我们开发了基于近红外荧光的EMSA试剂,并解决荧光探针标记等问题。Viagene现在能够对每一种转录因子的EMSA测定提供三种不同测定方法的试剂供客户选择。下表列出每种测定方法的优缺点及所需的仪器设备。在表下面,我们用示意图解释了每种测定方法的大致步骤及所需要的时间。请有需要的客户结合各自的情况选用适当的试剂,有任何疑问,请与我们联系。

 

1. 三种测定方法的比较

  探针直染EMSA 近红荧光探针EMSA 生物素探针EMSA
产品名 gsEMSA-FK irEMSA-FK biEMSA-FK
目录号 gs+TF序列号 ir+TF序列号 bi+TF序列号
所需探针 非标记探针 近红荧光标记探针 生物素标记探针
Poly[dI:dC] 不允许使用 一般都用 一般都用
凝胶电泳时间 1小时左右 1小时左右 1.5小时左右
必需仪器设备 电泳装置,成像仪或扫描仪。 电泳装置,荧光成像仪或扫描仪,推荐美国Li-Cor的近红外扫描仪。 电泳装置,DNA紫外交联仪,X光胶片冲印设备或化学发光成像仪。
测定灵敏度
所需时间 2小时 2.5小时 5-6小时
DNA染液 需要 - -
核蛋白用量 15-25ug 2-5ug 2-5ug
适用样品 仅用于纯化蛋白 粗制样品或纯化蛋白均可 粗制样品或纯化蛋白均可

 

2. 三种测定方法的原理与主要步骤。

ECL/Biotin EMSA IR (近红外荧光)EMSA 探针直染EMSA
生物素探针EMSA 近红荧光探针EMSA 探针直接染色EMSA

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